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HyFectTM細胞轉染試劑

2021-02-08

轉染是一種常見的方法學,將外源核酸送入真核細胞內,以研究所關注的基因的功能或生產目標蛋白質。根據其實踐上所需的材料和儀器,轉染可分為化學性和物理性兩種方法。由於核酸分子不論是大型的DNA質體或小片段的干擾性的RNA寡核苷酸都屬親水性並帶負電荷,不能直接通透細胞膜。因此市面上已開發了數種轉染試劑產品輔助DNA及RNA分子的載運,穿過細胞膜並抵達細胞核內。

各式各樣的合成載體,主要為帶陽性電荷的聚合物或脂質,因為能藉靜電作用吸附核酸亦和細胞膜的磷脂質成分性質相容,在化學類的轉染試劑中擔當關鍵性的因子。如此的水油兩親性質可從他們的分子構型獲得根據,一般包含三個部分:可質子化之胺基氮原子所形成的親水性頭基、紐繫性質的官能基、以及呈疏水性的分子骨架。生物可分解的聚乙烯亞胺和殼聚糖是最為著名的兩例,在生物體內或體外試管實驗中皆能轉染多種組織及細胞株的陽離子聚合物。微脂體型的轉染試劑與前述聚合物型具有相當的活性可凝集核酸形成轉染複合體,它們典型上由組成一個「主力」陽離子脂質和一個「助手」電中性脂質配對而成,例如非常知名的LIPOFECTAMINE®即是DOTAP-DOPE兩種脂質的混合物。細胞攝取轉染複合體的機制涉及胞膜窖和網格蛋白所介導的內吞作用。成本效益,以及在不同細胞株間呈差異化的細胞毒性、培養基成分敏感度與轉染效率表現經常左右著研究者對轉染試劑種類的選擇。

HyFect™是以陽離子聚合物為本,偉喬生醫精心配製的轉染試劑。歸功於特殊配方,HyFect™不僅解決了繫於轉染試劑的難題諸如細胞毒性和血清敏感度,且橫跨多種細胞類型,無論操作DNA或RNA,都能展現高效率轉染。整個轉染過程可以在三十分鐘內完成,不需移除血清。以下展示HyFect™的實驗測試結果和使用者反饋的學術文章發表。

與其他化學轉染試劑相比,與競廠I相比,HyFect™在293T和BHK-21細胞有更好的轉染效果(圖1)。當轉染Huh-7細胞時,與競廠I和競廠J相比,HyFect™具有較高的細胞存活率(圖2)。HyFectTM已用於多種細胞類型的轉染(表1)並被多篇科學文章引用(表2)。此外,HyFect™能夠導入microRNA並成功敲低目標基因的表達(圖3)。

圖1 比較HyFect和競廠I在(A) 293T細胞和(B) BHK-21之細胞轉染效率

圖2. (A) 轉染後的細胞毒殺性測試。(B) GFP蛋白質在Huh-7細胞中過表達的比較。競廠I、競廠J和HyFect™

圖3. 利用HyFect™轉染miRNA將目標基因的蛋白質表現敲低

表1. 利用HyFect™成功轉染的細胞株列表

表2. HyFect™引用文獻

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